本周hzangs在最新文献中选取了11篇分享给大家，前两篇文章都是综述神经元来源细胞外囊泡相关研究技术和研究进展的，第1篇探讨了目前脑源性细胞外囊泡的分离方法和标志物等问题；第2篇文章探讨了神经源性细胞外囊泡的研究进展和挑战；第3篇问题介绍了ß-catenin对肿瘤细胞外囊泡的调控作用；第7篇文章介绍了细胞外囊泡通过调控胰腺癌m5C修饰调控神经重塑；第11篇文章介绍了精液来源细胞外囊泡通过调控Treg分化来介导父系抗原耐受过程。

1.Assessment of brain-derived extracellular vesicle enrichment for blood biomarker analysis in age-related neurodegenerative diseases: An international overview. 

评估脑源性细胞外囊泡富集程度以用于与年龄相关的神经退行性疾病的血液生物标志物分析：国际概况。

[Alzheimers Dement] PMID: 38864416

摘要：血液中的脑源性细胞外囊泡 (BEV) 可用于微创研究与年龄相关的神经退行性疾病 (NDD) 的中枢神经系统 (CNS) 特异性标志物。基于聚合物的 EV 和基于免疫沉淀 (IP) 的血液 BEV 富集方案已越来越受欢迎。我们系统地研究了各研究方案的一致性，并确定了与这些方案相关的蛋白质的 CNS 特异性。系统地识别了使用基于聚合物和/或基于 IP 的 BEV 富集方案研究血液中BEV 的 NDD 文章，并比较了这些方案。评估了用于 BEV富集和/或后富集的蛋白质的 CNS 和脑细胞类型特异性、细胞外结构域 (ECD+) 以及在 EV 数据库中的存在情况。我们发现，共有 82.1% 的研究使用基于聚合物 (ExoQuick) 的 EV 富集，92.3% 的研究使用L1CAM 进行基于 IP 的 BEV 富集。不同研究的离心时间不同。系统鉴定的 82 种蛋白质中，共有 26.8% 是CNS 特异性的：50% 为 ECD+，77.3% 列在 EV 数据库中。我们确定了需要标准化的协议步骤，并推荐了可用于 BEV 富集或作为 BEV 生物标志物的其他 CNS 特异性蛋白质。

2.Prospects and challenges in using neuronal extracellular vesicles in biomarker research. 

神经元细胞外囊泡在生物标志物研究中应用的前景与挑战。

[Alzheimers Dement] PMID: 39009473

摘要：细胞外囊泡 (EV) 有望成为疾病生物标志物的来源。EV 的多种分子货物可能表明其来源组织的状态，即使在整个血浆的复杂背景下也是如此。目前可用于评估大脑健康生物标志物的主要工具包括大脑成像和患者脑脊液分析。考虑到这些方法的成本和困难，从血液中分离神经元来源的 EV (NEV) 是一种识别大脑特异性生物标志物的有吸引力的方法。这一观点描述了当前基于 EV 和 NEV 的生物标志物研究的主要挑战。这些挑战包括 EV 的丰度相对较低、缺乏经过验证的分离方法以及难以寻找免疫捕获 NEV 的适当靶标。我们讨论了在 NEV 发挥其生物标志物研究潜力之前必须解决这些挑战。

3.Emerging role of oncogenic ß-catenin in exosome biogenesis as a driver of immune escape in hepatocellular carcinoma.

致癌基因ß-catenin在外泌体生物发生中作为肝细胞癌免疫逃逸的驱动因素所发挥的新兴作用。

[Elife] PMID: 39008536

摘要：免疫检查点抑制剂在癌症患者中产生了令人鼓舞的结果。然而，大多数ß-catenin 突变的肿瘤被描述为缺乏免疫浸润并对免疫疗法有抗性。致癌ß-catenin影响免疫监视的机制仍不清楚。在此，我们强调了 ß-catenin 在调节外泌体途径以及肝细胞癌 (HCC) 中的免疫/癌细胞通讯方面的作用。我们发现，突变的 ß-catenin 抑制了肝癌细胞系和 HCC 患者样本中外泌体生物合成的两个主要参与者 SDC4 和 RAB27A 的表达。使用纳米粒子跟踪分析和活细胞成像，我们进一步证明活化的ß-catenin 抑制了外泌体的释放。然后，我们在 3D 球体模型中证明了ß-catenin 的激活通过外泌体分泌缺陷促进免疫细胞浸润的减少。综上所述，我们的研究结果首次证明致癌基因ß-catenin 在外泌体生物合成中起着关键作用。我们的研究为ß-catenin 突变对肿瘤微环境重塑的影响提供了新的见解，这可能导致开发增强免疫治疗反应的新策略。

4.Aberrant regulation of serine metabolism drives extracellular vesicle release and cancer progression. 

丝氨酸代谢的异常调节会导致细胞外囊泡的释放和癌症的进展。

[Cell Rep] PMID: 39024098

摘要：癌细胞分泌细胞外囊泡 (EV) 来调节肿瘤微环境中的细胞，使其有利于自身生长并在患者体内存活。尽管新出现的证据已经证明了 EV 释放的分子机制，但调节癌症特异性 EV 分泌仍然具有挑战性。在本研究中，我们应用 microRNA 文库揭示癌细胞分泌 EV 的普遍机制。在这里，我们确定了 miR-891b 及其直接靶基因磷酸丝氨酸氨基转移酶 1 (PSAT1)，它通过丝氨酸-神经酰胺合成途径促进 EV 分泌。抑制PSAT1 会影响多种癌症中 EV 的分泌，这表明miR-891b/PSAT1 轴具有癌细胞分泌 EV 的共同机制。有趣的是，异常的 PSAT1 表达也通过 EV 分泌调节癌症转移。我们的数据将 PSAT1 控制的 EV 分泌机制与癌症转移联系起来，并展示了该机制作为多种癌症治疗靶点的潜力。

5.Boron Neutron Capture Therapy-Derived Extracellular Vesicles via DNA Accumulation Boost Antitumor Dendritic Cell Vaccine Efficacy. 

硼中子俘获疗法衍生的细胞外囊泡通过 DNA 积累增强抗肿瘤树突状细胞疫苗功效。

[Adv Sci (Weinh)] PMID: 39021327

摘要：辐射过的肿瘤细胞衍生的细胞外囊泡 (RT-EVs) 包裹着大量来自辐射过肿瘤细胞的 DNA 片段，此外还充当多种肿瘤抗原的整合体。越来越多的证据表明，这些来自受损细胞的 DNA 片段参与下游免疫反应，但它们中的大多数在被纳入衍生的 RT-EVs 之前就在细胞中降解了，因此 DNA 片段的低丰度限制了 RT-EVs 的免疫反应。本研究发现，不同的辐射会影响 RT-EVs 中 DNA 片段的命运。硼中子俘获疗法 (BNCT) 通过造成更多的 DNA 断裂和抗 DNA 氧化核酸酶降解来诱导 RT-EVs (BEVs) 中的 DNA 积累。这归因于 10B 中子俘获反应中 α 粒子的高线性能量转移 (LET) 特性。当 BEVs 被树突状细胞 (DC) 内化时，它会激活 DNA 传感通路，从而导致功能增强，包括抗原呈递、迁移能力和细胞因子分泌。在接种 BEVs 培养的 DCs (BEV@BMDCs) 后，效应 T 细胞显著扩增并浸润到肿瘤中，表明具有强大的抗肿瘤免疫激活作用。BEV@BMDCs 不仅有效抑制原发性肿瘤生长和转移形成，而且还能引发长期免疫记忆。总之，成功的 DC 疫苗可作为肿瘤疫苗的有希望的候选疫苗。

6.Multimodal smart systems reprogramme macrophages and remove urate to treat gouty arthritis.

多模式智能系统重新编程巨噬细胞并去除尿酸以治疗痛风性关节炎。

[Nat Nanotechnol] PMID: 39020102

摘要：痛风性关节炎是一种慢性进行性疾病，其特征是关节中尿酸水平高，并伴有炎症性免疫微环境。临床数据表明，单靠尿酸降低疗法或抗炎疗法往往无法取得令人满意的效果。我们在此开发了一种智能仿生纳米系统，其特点是“外壳”由来自 M2 巨噬细胞和外泌体的融合膜组成，该融合膜包裹着载有尿酸酶、铂包透明质酸/聚多巴胺纳米酶和白藜芦醇组合的脂质体。该纳米系统针对发炎的关节，促进局部抗炎巨噬细胞的积聚，而尿酸酶和纳米酶则降低关节内的尿酸水平。此外，定点近红外辐射通过铂和聚多巴胺的作用提供局部温和热疗，启动热诱导组织修复。这些成分的联合使用可以产生协同作用，增强整体效果，从而加快受损关节组织的恢复。

7.Extracellular vesicle-packaged PIAT from cancer-associated fibroblasts drives neural remodeling by mediating m5C modification in pancreatic cancer mouse models. 

来自癌症相关成纤维细胞的细胞外囊泡包装的 PIAT通过介导胰腺癌小鼠模型中的 m5C 修饰来驱动神经重塑。

[Sci Transl Med] PMID: 39018369

摘要：神经周围侵袭（PNI）是胰腺癌常见的生物学特征。尽管PNI在胰腺癌转移、复发和术后生存率低下中起着关键作用，但其机制尚不清楚。临床样本分析和内镜超声弹性评分表明，癌相关成纤维细胞（CAFs）与PNI的发生密切相关。此外，CAF衍生的细胞外囊泡（EVs）参与了背根神经节共培养和小鼠坐骨神经模型中的PNI。接下来，我们证明CAFs通过PNI相关转录本（PIAT）的细胞外囊泡传输来促进PNI。机制上，PIAT特异性地结合YBX1并阻断YBX1-Nedd4l相互作用从而抑制YBX1泛素化和降解。此外，PIAT 以 5-甲基胞嘧啶 (m5C)依赖的方式增强了 YBX1 与 PNI 相关 mRNA 的结合。YBX1 中的m5C 识别基序或下游靶基因中的 m5C 位点的突变可逆转PIAT 介导的 PNI。与这些结果一致，使用 KPC 小鼠模型的分析表明 PIAT/YBX1 轴通过 m5C 修饰增强了 PNI。临床数据表明，胰腺癌患者血清 EVs 中 PIAT 的表达与神经侵袭程度和预后有关。我们的研究揭示了肿瘤微环境 (TME) 中 PIAT/YBX1 信号轴在促进肿瘤细胞 PNI 中的重要作用，为精准干扰 TME 中的 CAFs 和 RNA 甲基化以抑制胰腺癌 PNI 提供了新的靶点。

8.HIV-1 Nef is carried on the surface of extracellular vesicles. 

HIV-1 Nef 位于细胞外囊泡的表面。

[J Extracell Vesicles] PMID: 39016173

摘要：细胞外囊泡 (EV) 是健康和疾病状态下细胞间通讯的关键介质，可将生物活性分子从产生囊泡的细胞运送到受体细胞。在 HIV 感染的情况下，EV 已被证明携带病毒蛋白 Nef，这是一种与 HIV 相关并发症有关的关键致病因素。尽管人们已经认识到这一点，但 Nef 在囊泡内的具体定位仍然难以捉摸。本研究通过研究含有 Nef 的 EV 来解决这一关键的知识空白。总释放的 Nef 中不到 1% 与 EV 相关；大多数 Nef 以受损细胞释放的游离蛋白形式存在。尽管如此，EV 相关 Nef 在下调主要胆固醇转运蛋白 ABCA1（与 Nef 致病作用相关的一个关键方面）方面的活性与上清液中存在的游离 Nef 相当。通过一系列生化和显微镜分析，我们证明大多数 EV 相关 Nef 分子位于囊泡的外表面。这种独特的分布促使人们考虑将含有 Nef 的 EV 作为旨在预防或治疗 HIV 相关并发症的免疫治疗干预的潜在靶点。总之，我们的研究结果揭示了 Nef 在 EV 内的定位和功能活性，为开发靶向免疫疗法以减轻 HIV 相关并发症的影响提供了宝贵的见解。

9.Virus-Mimetic Extracellular-Vesicle Vaccine Boosts Systemic and Mucosal Immunity via Immune Recruitment. 

病毒模拟细胞外囊泡疫苗通过免疫募集增强全身和粘膜免疫。

[ACS Nano] PMID: 39013102

摘要：粘膜疫苗不仅可以抑制感染和防止疾病症状的发展，还可以防止病毒感染呼吸道粘膜。SARS-CoV-2 刺突受体结合域 (RBD) 是一个引人注目的疫苗靶点，但由于粘膜免疫原性不佳而受到破坏。在这里，我们报告了一种利用基因工程和树突状细胞膜出芽开发的 SARS-CoV-2 模拟细胞外囊泡疫苗。粘膜免疫后，疫苗会迅速募集抗原呈递细胞，从而引发强烈的先天免疫反应。值得注意的是，它无需使用佐剂，并且可以通过肌肉内和气管内接种来诱导生发中心形成。它不仅能引发高水平的 RBD 特异性抗体，还能刺激呼吸道粘膜的广泛细胞免疫。顺序免疫策略，首先是肌肉注射，然后是气管内加强注射，通过高水平的 IgA 和组织驻留记忆 T 细胞反应显著增强粘膜免疫，从而建立起对假病毒感染的强大防御。

10.Proteomic profiling of human plasma extracellular vesicles identifies PF4 and C1R as novel biomarker in sarcopenia.

人类血浆细胞外囊泡的蛋白质组学分析表明 PF4 和 C1R 是肌肉减少症的新生物标志物。

[J Cachexia Sarcopenia Muscle] PMID: 39009419

摘要：肌肉减少症是一种随着年龄增长而逐渐且普遍的肌肉质量和功能丧失的疾病，由于其患病率高且具有重大的社会经济影响，是老年人的主要健康问题之一。尽管人们为就肌肉减少症的定义、诊断测试和临界值达成共识付出了巨大努力，但对于该疾病的非侵入性、特异性和敏感性生物标志物的需求仍然迫切且尚未得到满足。细胞外囊泡 (EV) 存在于包括血浆在内的不同生物流体中，其货物反映了细胞生理学。这项研究分析了肌肉减少症和健壮患者的 EV 蛋白质组，以寻找可用于诊断该疾病的差异蛋白。我们分离了 29 名健壮对照者（年龄 73.4 ± 5.6 岁；11 名男性和 18 名女性）和 49 名 65 岁及以上的肌肉减少症患者（年龄 82.3 ± 5.4 岁；15 名男性和 34 名女性）血浆中的小 EV（sEV），并通过蛋白质组学分析其货物。使用 ELISA 进一步验证肌肉减少症和健壮患者之间 sEV 浓度不同的蛋白质。将这些候选物的浓度与 EWGSOP2 肌肉减少症低肌肉强度和低身体机能测试相关联，并进行受试者工作特征（ROC）曲线分析以评估它们的诊断能力、敏感性和特异性。我们发现在肌肉减少症和健壮样本中均鉴定出 157 种 sEVs 蛋白。其中，48种蛋白质从未在 ExoCarta 和 Vesiclepedia数据库中报道过。统计分析发现，8 种蛋白浓度在组间存在显著差异：PF4（log2 FC = 4.806）、OIT3（log2 FC = -1.161）、MMRN1（log2 FC = -1.982）、MASP1（log2 FC = -0.627）、C1R（log2 FC = 1.830）、SVEP1（log2 FC = 1.295）、VCAN（FC = 0.937）和SPTB（log2 FC = 1.243）。其中，血小板因子4（PF4）浓度最低，而补体 C1r 亚成分（C1R）在肌少症患者中升高最多，这些结果已通过 ELISA 得到证实（分别为 P = 1.07E-09 和 P = 0.001287）。候选蛋白的浓度与目前使用的 EWGSOP2 测试显着相关。ROC 曲线分析显示 PF4 和 C1R 的曲线下面积分别为0.8921 和 0.7476。选择 PF4 的最优值，灵敏度和特异性分别为 80% 和 85.71%，而 C1R 的最佳截断值可实现肌肉减少症的诊断，灵敏度和特异性分别为 75% 和 66.67%。我们的研究结果支持将 EV PF4 和 C1R 确定为肌肉减少症的血浆诊断生物标志物，并为研究这些囊泡内容物在疾病发病机制中的作用打开了大门。

11.Extracellular vesicles from seminal plasma interact with T cells in vitro and drive their differentiation into regulatory T-cells.

精浆中的细胞外囊泡在体外与 T 细胞相互作用并促使其分化为调节性 T 细胞。

[J Extracell Vesicles] PMID: 39007430

摘要：精浆在女性生殖道内和胎儿发育期间诱导对父系同种异体抗原的免疫耐受性。最近的证据表明精浆中的细胞外囊泡 (spEVs) 发挥了作用。我们从输精管切除术男性捐赠的精浆中分离出 spEVs，从而排除了睾丸或附睾的任何贡献。先前的分析表明，这种分离的 spEVs 主要来源于前列腺。在这里，我们观察到，当分离的荧光标记 spEVs 与外周血单核细胞混合时，它们主要被单核细胞吞噬，在较小程度上也被 T 细胞吞噬。在混合淋巴细胞反应中，T 细胞增殖被 spEVs 抑制。当分离的 T 细胞被抗 CD3/CD28 涂层珠子激活时，证明了 spEVs 对 T 细胞的直接影响。同样，spEVs 干扰 T 细胞增殖，以及 CD25 的表达和IFN-γ、TNF 和 IL-2 的释放。此外，spEVs 刺激 CD4+CD25+CD127-T 细胞表达 Foxp3 和 IL-10，表明分化为调节性 T 细胞 (Tregs)。用蛋白酶 K预先处理 spEVs 可消除其对 T 细胞的影响，表明需要表面暴露的 spEV 蛋白。腺苷 A2A 受体特异性拮抗剂 CPI-444 也降低了 spEVs 对 T 细胞的影响，这与 Tregs 的发展及其免疫抑制功能受腺苷-A2A 受体信号传导影响的观点一致。我们发现腺苷在 spEV 中高度富集，并提出 spEV 靶向 T 细胞并被 T 细胞内吞，之后它们可能会将其腺苷含量释放到内体腔中，从而允许 spEV 靶向 T 细胞中的内体定位A2A 受体信号传导。总的来说，这些数据支持 spEV 可以直接启动 T 细胞分化为 Treg 的想法。

今天的整理就到这里。希望大家可以有所收获。大家下周见！